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人白細(xì)胞介素-28ELISA檢測(cè)
發(fā)布時(shí)間： 2012-09-07 點(diǎn)擊次數(shù)： 1334次人白細(xì)胞介素-28ELISA檢測(cè)
本試劑盒僅供研究使用 標(biāo)本：血清或者血漿
二、注意事項(xiàng)
1. 此試劑為體外檢測(cè)試劑，效期內(nèi)使用，試劑應(yīng)視為傳染物，不同總批號(hào)的試劑不能混用。
使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出。室溫放置至少30分鐘，
濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶后，請(qǐng)于37℃孵育15分鐘。
濃縮樣品稀釋液出現(xiàn)結(jié)晶后，請(qǐng)于37℃孵育15分鐘
若24小時(shí)內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，標(biāo)本可存放于2～8℃。不需及時(shí)實(shí)驗(yàn)，標(biāo)本-20℃保存，避免反復(fù)凍融。
在反復(fù)清洗微孔板，并扣干微孔中的殘余液體，否則將降低度，造成吸光度偏離的假像。
加樣完畢后，應(yīng)注意輕微搖動(dòng)微孔反應(yīng)條，以便使孔中的液體充分混勻。
試劑盒保存于2～8℃，請(qǐng)勿冷凍，有效期請(qǐng)見盒內(nèi)標(biāo)示。人白細(xì)胞介素-28ELISA檢測(cè)
三、實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備
1．使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出，室溫放置至少30分鐘。
2．準(zhǔn)備各種實(shí)驗(yàn)儀器及材料，如微量移液器，吸頭，醫(yī)用蒸餾水等
3．濃縮洗液與醫(yī)用蒸餾水1︰19倍稀釋后成為應(yīng)用洗滌液
4．濃縮樣品稀釋液與醫(yī)用蒸餾水1︰4倍稀釋成應(yīng)用樣品稀釋液
5．用應(yīng)用樣品稀釋液來稀釋樣品，按照1：100的體積比來稀釋樣品如10μl的樣品加入到1ml的應(yīng)用樣品稀釋液中，充分混勻待用。）人白細(xì)胞介素-28ELISA檢測(cè)
四、操 作 步 驟
1．取出酶標(biāo)板，設(shè)空白孔，依照次序?qū)?yīng)分別加入100μl的標(biāo)準(zhǔn)品于空白微孔中（空白孔視為0號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品，用醫(yī)用蒸餾水替代）
2、分別標(biāo)記樣品編號(hào)，加入100μl的稀釋樣品于空白微孔中（不同的樣本采用不同的吸頭）。
3、將酶標(biāo)板置于37℃溫育30分鐘；
4、將酶標(biāo)板板取出，將其中的液體甩去，每個(gè)孔中全部加滿應(yīng)用洗滌液后，立即甩去液體;
5、每個(gè)孔中加滿應(yīng)用洗滌液后，輕微振搖酶標(biāo)板30秒后將孔中的應(yīng)用洗滌液甩去，在吸水紙上將酶標(biāo)板拍干。
6、重復(fù)第5個(gè)步驟5次，在吸水紙上將酶標(biāo)板拍干。
7、在標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣品孔中加入100μl的酶標(biāo)偶合溶液。
8、將96孔板置于37℃溫育30分鐘。
9、將酶標(biāo)板取出，將其中的液體甩去，每個(gè)孔中全部加滿應(yīng)用洗滌液后，立即甩去液體。
10、每個(gè)孔中再次加滿洗滌應(yīng)用液后，室溫輕微振搖酶標(biāo)板30秒后將孔中的應(yīng)用洗滌液甩去，在吸水紙上將酶標(biāo)板拍干。
11、重復(fù)第5個(gè)步驟5次，在吸水紙上將酶標(biāo)板拍干。
12、在每個(gè)孔中加入底物A 50μl后立即加入底物B 50μl。輕輕振蕩混勻。（A液、B液采用不同的吸頭加樣）
13、將酶標(biāo)板置于37℃避光溫育反應(yīng)15分鐘。
14、每個(gè)微孔中加入50μl的終止液，輕輕振蕩混勻。
15、在酶標(biāo)儀上，450nm處測(cè)定OD; 顯色后，15分鐘內(nèi)進(jìn)行測(cè)定。
16、根據(jù)制備的標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算樣本含量五、結(jié) 果 判 斷
1. 儀器值：于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值；
2、檢測(cè)值范圍：0－400pg/ml
3、敏感度：1.0pg/mlTRAF2/TNF-R2（TNF receptor-associatedfactor 2） 腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子2抗體 0.2ml
TRAF3/CD40bp （CD40 binding protein） CD40結(jié)合蛋白/CD40受體相關(guān)因子1抗體 0.2ml
TRAF6 （TNF receptor-associated factor 6） 腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子6抗體 0.2ml
TRAIL/Apo2L （tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand） 腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體/凋亡素2配體抗體 0.1ml
TRAIL/Apo2L （tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand） 腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體/凋亡素2配體抗體 0.2ml
Mouse IgM 小鼠IgM （免疫親和純化） 1mg
Mouse IgM 小鼠IgM （免疫親和純化） 10mg
pig IgG （親和純化）豬IgG 10mg
pig IgG （親和純化）豬IgG 50mg
Transthyretin （TTR/prealbumin） 轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白抗體 0.2ml
TRBF1/TRF1 （omeric repeat binding factor 1） 端粒體復(fù)制結(jié)合因子1抗體 0.2ml
TRF（Transferrin） 抗轉(zhuǎn)鐵蛋白抗體 0.2ml
TRF2（omere repeat binding factor 2） 端粒結(jié)合蛋白2抗體 0.2ml
omerase Binding Protein，P23 端粒酶結(jié)合蛋白P23抗體 0.2ml
TRIM32（tripartite motif protein 32） TRIM32抗體 0.2ml
pig IgM （親和純化）豬IgM 10mg
Mink IgG 水貂IgG （親和純化） 1mg
Mink IgG 水貂IgG （親和純化） 10mg
Rabbit IgG 兔IgG（親和層析純化） 10mg
Rabbit IgG 兔IgG（親和層析純化） 50mg